• <menu id="og0oe"><strong id="og0oe"></strong></menu>
  • 歡迎來到上海通蔚!
    請登錄 注冊 購物車

    021-54845833/15800441009

    品質保證 · 通蔚試劑

    首頁>>公司新聞>>上海通蔚生物為您詳細介紹大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒的應用

    上海通蔚生物為您詳細介紹大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒的應用

    實驗原理:大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被肝細胞生長因子(HGF)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細胞生長因子(HGF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
    標本要求
    1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
    2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
    3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
    4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
    操作流程
    1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
    2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
    3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
    4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
    5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
    6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

    以上內容由上海通蔚生物為您詳細介紹大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒的應用科研數據。望采納!

    在线 高清 免费av,免费av网站,免费av片,永久免费AV无码国产网站18禁
  • <menu id="og0oe"><strong id="og0oe"></strong></menu>